细胞培养中的常用试剂

动物细胞或组织离开体内到体外进行培养时，需要为其提供生长所需的各种营养物质以及为了让细胞在体外能够更好的生长所需要的各种试剂。本期就简单向大家介绍一下细胞在培养过程中所用到的一些试剂成分以及它们的作用。

01 细胞培养基成分

(1).基础培养基  

常见的基础培养基主要有MEM，DMEM，RPMI，主要提供包含葡萄糖、氨基酸、水、微量元素，碳酸氢钠等的缓冲体系。

● 谷氨酰胺    

是细胞生长所必须的必需氨基酸，参与蛋白质合成和核酸代谢。

● 酚红指示剂

一种常用的酸碱指示剂，在酸性时显黄色，中性时显红色，碱性时为紫色，酚红在培养基中作为PH值的指示剂。

● 碳酸盐/PH缓冲系统

一种生理PH缓冲系统，由于细胞代谢过程中产酸，培养基中的HCO3-会逐渐被消耗掉，所以需及时补充CO2才能维持PH维持在一定范围内。

(2).动物血清

在基础培养基中加入2%-20%血清成为完全培养基，血清不仅可以为细胞提供生长所需的基本营养物质，还含有生长因子、激素、微量元素和离子等参与细胞代谢的重要成分。

(3).抗生素

为了防止细胞在培养过程被污染，通常会向完全培养基中添加青霉素-链霉素混合液，即双抗，青霉素主要对革兰氏阳性菌有效，链霉素对许多革兰氏阴性菌有效。

02 胰蛋白酶-EDTA

胰蛋白酶可使细胞间的蛋白质水解进而细胞离散开，EDTA是一种化学螯合剂，毒性小，对贴壁细胞有离散作用，两者联合使用，分散细胞的效力更高，这一步被称为消化细胞。对于不同细胞而言，对于胰酶使用时的温度、时间、浓度都有不同的要求，消化不足，细胞不能被消化下来，消化过度会造成细胞损伤。因培养基中的血清可以降低胰酶的活性，通常使用完全培养基来终止细胞消化。

03 PBS缓冲液

PBS是磷酸缓冲盐溶液，具有盐平衡、可调整的适宜PH缓冲作用，一般用来清洗细胞，可维持细胞渗透压。

04 二甲基亚砜(DMSO)

一种重要的渗透型细胞保护剂，是细胞冻存液中的重要成分。细胞在冻存过程中，DMSO能快速穿透细胞膜进入细胞内，降低冰点、延缓冻存过程、提高细胞内离子浓度，减少细胞内冰晶的形成，可减少细胞损伤。

05 支原体抑制剂

支原体污染在细胞培养过程中常见的一种污染源，然而在污染初期可以使用支原体抑制剂来消除细胞液中的支原体，使实验可以继续进行下去。

06 台盼蓝染料

一种检测细胞膜完整性常用的生物染色试剂。死细胞由于细胞膜的完整性丧失，通透性增加，细胞可被台盼蓝染成蓝色，而活细胞因为有完整地细胞膜，能够排斥台盼蓝进入细胞内，因此不会被染色。在显微镜下通过细胞颜色可以辨别活死细胞，方便活细胞计数。

捷美JIMEI

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