细胞培养是指从生物体取出组织，分离的原代细胞或细胞系，在体外模拟体内生理环境（无菌，适宜温度，PH值和一定营养条件）等特定的条件下培养，使之生存并生长。细胞培养是生命科学的基础，目前细胞培养工作已广泛应用于生物学、医学、新药研发等各个领域。

这期主题主要围绕细胞培养，向大家简单介绍细胞培养相关的一些内容，如细胞培养的具体流程、细胞培养所需的条件、细胞培养的注意事项及问题分析等。细胞培养的具体流程主要分为:细胞复苏、细胞传代、细胞冻存。

本期让我们先来了解一下

——关于细胞复苏的相关内容

一、什么是细胞复苏？

细胞复苏是将休眠的细胞重新活化,使之重新生长进入细胞周期,进而分裂产生子细胞的过程。

二、细胞复苏的实验操作步骤

1、从液氮罐或-80℃冰箱中取出冻存管，用冰盒将其转移至细胞房，迅速将冻存管投入到已经预热的水浴锅中迅速解冻，并不断的摇动，使管中的液体迅速融化。

2、约1-2min后冻存管内液体完全溶解，取出用酒精棉球擦拭或酒精喷洒冻存管的外壁，再拿入超净台内，用移液枪将细胞液转移至含有5mL完全培养基的15mL离心管中，1000rpm离心5min。

3、弃去上清，用1mL完全培养基重悬细胞团块，制备细胞悬液，然后将细胞悬液加进含有4mL完全培养基的细胞培养瓶中，盖上瓶盖混匀。

4、将细胞培养瓶放入37℃、5%CO2培养箱中培养。

注意事项

1.细胞复苏的原则为快速融化：必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃，使细胞外冻存时的冰晶迅速融化，避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶，对细胞造成损害。

2.水浴锅一定要提前预热到37℃。

3.一次性在水浴锅内融化的冻存管不要太多，会导致传热不佳，延长融化时间，对细胞造成损害。

4.实验过程中每次将物品拿进超净台中前，一定要向其喷洒75%酒精消毒，或用酒精棉球擦拭，防止污染，实验全程无菌操作。

5.对于某些细胞比较脆弱，完全培养基需要提前预热后再使用。