一、实验目的

比较捷美/精骐191L气套式CO₂恒温培养箱与某品牌CO₂细胞培养箱对培养不同种类细胞的增殖/活力的影响。

二、实验原理

细胞增殖/活力（CCK8）：

试剂中的WST-8 (2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐)，在电子载体存在的情况下，被细胞内的脱氢酶还原为具有高度水溶性的橙黄色甲瓒产物，生成的甲瓒产物的量与活细胞的数量成正比。

三、实验准备

3.1细胞培养相关试剂及仪器

恒温水浴锅

CO₂恒温培养箱

Esco超净台

冰箱和液氮罐分隔架-MCF系列

冰箱分隔架-UF系列

冰盆/冰桶

3.2样品制备

四、CCK8增殖能力检测

1 通过细胞培养调整细胞状态至对数生长期。

2 在96孔板每孔中铺入细胞，293T细胞和RAW264.7细胞按照1×104/100uL/孔。CD4+ T细胞按照5×105/100uL/孔，注意：铺CD4+ T细胞之前按照1ug/mL anti-CD3包板， 1ug/mL anti-CD28与细胞同时铺板进行活化。

3 在细胞贴壁后48h时，加入10uL CCK8。在1-4h内每半小时测一次OD450nm，取舍数值的原则为尽量把OD值控制在1.0-1.5。

4 最后进行统计学分析：用GraphPad Prism6软件作图及分析实验数据，样本间的比较采用t检验，p<0.05为显著差异。

五、实验结果

六、试用体验

01

自动高温灭菌功能十分方便高效，节约实验人员时间。（权威测试，以下菌种杀灭率>99.999%，大肠杆菌(Escherichia coli)8099，金黄色葡萄球菌(Staphylococcus)ATCC. 6538，白色念珠菌(Candida albicans)ATCC. 10231，黑曲霉(Aspergillus niger)ATCC. 16404，黄曲霉(Asp.flavus)AS3.3950，绿色木霉(Trichoderma viride)AS3.2942）。

02

通过与其他品牌的CO₂培养箱对细胞培养的对比结果来看，捷美/精骐191L完全可以满足一般细胞的培养条件。

03

具有断电后通电自动恢复运行状态，可防止培养箱长时间处于关闭状态，导致细胞死亡。

04

运行安静稳定振动极小，对于培养要求较高的脑细胞、神经细胞也可满足。

05

配置彩色触控屏，设置培养条件操作简单；查询培养数据一目了然。

06

如选配WIFI监控器，可在手机进行远程数据监控，调整数据设置等操作。